目的:对朝鲜产赤芍与国产赤芍进行生药学比较研究, 为今后朝鲜产赤芍药材的质量评价提供一定的参考。方法:对朝鲜产赤芍和国产赤芍的原植物形态、性状特征、横切面特征、薄层色谱特征进行研究。结果:通过与国产赤芍比较, 明确了朝鲜产赤芍的性状、横切面特征;两者在与对照品色谱相应的位置上显相同的蓝紫色斑点。结论:朝鲜产赤芍与国产赤芍在生药学特征方面没有明显差异, 可为朝鲜产赤芍在国内药材市场的质量控制与临床应用提供依据。
赤芍为毛茛科植物芍药Paeonia lactiflora Pall.或川赤芍Paeonia veitchii Lynch的干燥根。芍药最早出自《神农本草经》, 被列为中品, 具有清热凉血、散瘀镇痛之功效, 赤芍为中医常用药, 临床应用量较大, 分布广泛, 其中多以内蒙古多伦多产赤芍为道地药材。赤芍具有多种活性成分, 包括单萜苷类、鞣质、儿茶素、芳香酸等, 对心血管系统疾病, 神经保护以及血液系统疾病都有很好的临床治疗效果。
近年来赤芍需求量不断增大, 国内野生品赤芍逐渐出现供不应求的局面。为了缓解这一情况, 发展人工栽培技术的同时, 也增加了赤芍的进口数量, 以满足市场需求。朝鲜产赤芍作为目前主要进口来源, 并未有相关文献或者相关报道对其质量控制提供参考依据。因而本实验将通过性状鉴别、显微鉴别及理化鉴别三方面对朝鲜产赤芍进行生药学鉴定, 并以国产赤芍作为参照, 为我国进口朝鲜产赤芍质量控制提供一定的参考。
切片机 (QPJ-1型) ;显微镜 (SMARTTe-320型) ;分析天平 (FA-1004B型) ;暗箱式紫外分析仪 (ZF-90型) ;普通硅胶GF254预制板 (青岛海洋化工厂) 。
芍药苷 (中国食品药品检定研究院, 批号:110736-200628) , 水合氯醛试液、稀甘油、番红染色液、固绿染色液、切片石蜡、中性树胶。甲醇为色谱纯, 其他试剂为分析纯。朝鲜产赤芍购置于通化市, 经长春中医药大学姜大成教授鉴定为芍药Paeonia lactiflora Pall., 国产赤芍为实验室自采于朝鲜族自治州延吉市, 标本存放于长春中医药大学药学院中药鉴定实验室。
朝鲜产赤芍的原植物形态:为多年生草本, 高60~80 cm。根肥大, 无毛, 纺锤形或圆柱形, 红褐色, 茎直立, 上部分枝, 基部有数枚鞘状膜质鳞片, 叶互生, 叶柄长达9 cm, 叶为2~4回三出复叶, 小叶狭卵形、椭圆形或披针形, 绿色, 长7.5~12 cm, 先端渐尖, 基部楔形或偏斜, 边缘具白色软骨质细齿, 两面无毛, 下面沿叶脉疏生短柔毛, 近革质, 花两性, 数朵生茎顶和叶腋, 直径7~12 cm, 苞片4~5, 披针形, 大小不等, 萼片4, 宽卵形或近圆形, 长1~1.5 cm, 绿色, 宿存, 花瓣9~13, 倒卵形, 长3.5~6 cm, 白色, 雄蕊多数, 花药黄色, 花盘浅杯状, 先端裂片钝圆。
国产赤芍原植物形态:多年生草本, 高达80 cm, 根纺锤状或圆柱状肥大, 红褐色, 折断面粉白色。茎圆柱形, 无毛, 近顶部分枝, 基部有数枚鞘状膜质鳞片, 后期脱落, 叶互生, 叶片近革质, 通常为2~4回三出复叶, 有柄, 长约7 cm, 小叶长圆形、椭圆形或披针形, 先端渐尖基部楔形, 上面绿色, 无毛, 下面浅绿色, 无毛或沿叶脉疏生毛, 边缘有白色软骨质细锯齿, 花顶生或腋生, 大形, 花梗长, 无毛, 生叶状苞片, 萼片4, 或3~5, 大小不等, 倒卵形椭圆形, 绿色或紫色, 宿存, 花瓣白色或粉红色, 通常10枚左右, 倒卵形或倒卵状椭圆形, 雄蕊多数, 花药黄色, 心皮2~5, 无毛, 柱头褐紫色。见图1。
注:A.朝鲜产赤芍;B.国产赤芍。
通过观察朝鲜产赤芍及国产赤芍药材的形状、大小、颜色、表面、质地、折断面、气、味等性状特征, 对二者进行性状特征描述。见图2。
注:A.朝鲜产赤芍;B.国产赤芍。
朝鲜产赤芍性状特征:多呈圆锥形, 一般根头粗大而根尖细小, 偶见多分枝, 多见单一枝, 弯曲或稍平直, 长度超过3 cm, 直径0.5~2 cm, 表面多为暗棕色或棕黑色, 少见黄色, 可见瘤状突起和茎残痕, 具细密的纵向沟壑状皱纹, 质地较硬且脆, 易折断, 断面平坦细腻, 有一圈褐色形成层, 木质部射线纹理不明显, 根尖部位皮层宽, 根中部和根头部皮层较窄, 气微香, 味微苦。
国产赤芍性状特征:呈圆柱形, 稍弯曲, 长10~40 cm, 直径0.6~3 cm。表面暗棕色至黑棕色, 粗糙, 有横向凸起的皮孔, 具粗而略扭曲的纵沟纹, 外皮易脱落。质硬而脆, 易折断, 断面平坦, 粉白色或黄白色, 皮部窄、类粉红色, 木部约占根的大部分, 射线明显, 有时具裂隙。气微香, 味稍苦、涩。
对朝鲜产赤芍和赤芍药材进行石蜡永久切片制作, 借助互动显微系统, 观察木栓层、皮层、形成层、韧皮部和木质部等各部位, 并记录横切面的显微特征。见图3。
注:1.木栓层;2.栓内层;3.韧皮部;4.形成层;5.木质部 (×10) A.朝鲜产赤芍;B.国产赤芍
朝鲜产赤芍石蜡横切面特征:木栓层由数列细胞组成, 为棕黑色, 形似长方形, 紧密排列。韧皮部可以看到一层薄壁细胞, 此外还可看到伴胞与筛管, 具波浪状形成层, 由多列紧密排列的棕色薄壁细胞组成。木质部由导管、木射线、伴胞以及木薄壁细胞组成, 导管类圆形, 呈中心放射状, 中心部位可见初生木质部, 木射线较宽, 薄壁细胞可见草酸钙簇晶和淀粉粒。
国产赤芍石蜡横切面特征:木栓层为数列棕色细胞, 栓内层薄壁细胞切向延长, 韧皮部较窄, 形成层成环, 木质部射线较宽, 导管群作放射状排列, 导管旁有木纤维, 薄壁细胞含草酸钙簇晶, 并含淀粉粒。
取朝鲜产赤芍药材粉末0.5 g, 加乙醇10 m L, 振摇5分钟, 滤过, 滤液蒸干, 残渣加乙醇2 m L使溶解, 作为供试品溶液1。另取国产赤芍药材粉末0.5 g, 同法制成供试品溶液2。再取芍药苷对照品, 加乙醇制成每1 m L含2 mg的溶液, 作为对照品溶液。照薄层色谱法 (附录ⅥB) 试验, 吸取上述三种溶液各4μL, 分别点于同一硅胶G板上, 以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸 (40∶5∶10∶0.2) 为展开剂, 展开, 取出, 晾干, 喷以5%香草醛硫酸溶液, 加热至斑点显色清晰。供试品色谱中, 在与对照品色谱相应的位置上, 显相同的蓝紫色斑点。见图4。
注:1.朝鲜产赤芍供试品;2.国产赤芍供试品;3.混合供试品;4.芍药苷对照品。
朝鲜产赤芍与国产赤芍的药材性状上极其相近, 鉴别要点为根多呈圆锥形, 一般根头粗大而根尖细小, 暗棕色或棕黑色, 有瘤状突起和茎残痕, 纵向沟壑状皱纹, 木栓层容易脱落。折断面有褐色形成层。根尖部位皮层宽, 根中部和根头部皮层较窄。朝鲜产赤芍显微特征的鉴别要点为朝鲜产赤芍根石蜡横切面木栓层有10余列棕黑色, 形似长方形细胞紧密排列;形成层为波浪形, 由多列排列紧密的棕色薄壁细胞组成;可见初生木质部, 导管呈放射状排列, 由导管、木射线、伴胞以及木薄壁细胞组成。药材的薄层色谱检出朝鲜产赤芍、国产赤芍所显斑点与芍药苷在相应位置有相同颜色的斑点。试验结果表明朝鲜产赤芍与国产赤芍在原植物形态、性状、显微等生药学特征及薄层色谱鉴别结果方面无明显差异, 可以将朝鲜产赤芍确定为毛茛科植物芍药P.lactiflora Pall.。由于近年来北方药材市场赤芍药材的需求量急剧增加, 导致朝鲜产的赤芍通过各种渠道引进中国, 但却未经任何检验, 无法控制其药材质量, 对国内药材市场流通产生一定程度的影响, 试验结果为进一步研究朝鲜产赤芍药材的质量控制和推广应用提供了参考依据。